教你玩轉液相色譜儀

     液相色譜儀系統主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數據處理系統組成。對于整個(gè)系統而言，柱子、泵和檢測器是核心部件同時(shí)也是易出問(wèn)題的主要部位。

    作為一種高精密儀器，如果在使用過(guò)程中不按照正確操作的話(huà)，就容易導致一些問(wèn)題。其中zui常見(jiàn)的就是柱壓?jiǎn)?wèn)題、漂移問(wèn)題、峰型異常問(wèn)題。 今天泰坦化學(xué)就列出幾個(gè)常見(jiàn)故障現象，并附zui全可能性建議，讓你把故障挨個(gè)排除，重拾  信心，玩轉液相色譜不是夢(mèng)!

   現象1：出現基線(xiàn)不平的現象，后經(jīng)過(guò)沖洗正常，后又出現柱塞桿漏液，換了密封圈后正常，接著(zhù)測樣品時(shí)，泵發(fā)出很大的噪音，立即停止泵的運行，對泵進(jìn)行了潤滑后，噪音消失，進(jìn)樣后又發(fā)現出的峰峰高都特別低，又試了幾次zui后竟然什么峰也不出了，為什么?

   建議：

1,檢查液路是否正常,保證流量,密封性都對的

2,不接柱子進(jìn)純品看看檢測器有沒(méi)有響應,如果沒(méi)有就是檢測器出問(wèn)題了

3,檢查你的樣品是不是正常的

   現象2：液相色譜六合進(jìn)樣器，zui近堵住了，啟動(dòng)泵進(jìn)樣閥就開(kāi)始漏液，有人說(shuō)是進(jìn)完樣后沒(méi)用甲醇去進(jìn)樣清洗堵掉了，我想知道每次走完樣后是不是需要進(jìn)幾針甲醇去清洗，而漏液什么原因?

  建議：其實(shí)要知道六通閥有沒(méi)有堵，你可以在停泵的狀態(tài)下，用有機相來(lái)清洗，如果能夠正常清洗的話(huà)，那應該沒(méi)堵，如果溶劑打不進(jìn)去，那應該是堵了，或者你可以看看漏液的地方是不是有螺絲松了。

   現象3：使用液相色譜，將一個(gè)樣品連進(jìn)六針，峰面積差異很大，忽高忽低，這是為什么?

  建議：

1、進(jìn)樣器有的時(shí)候會(huì )出現氣泡，如果此時(shí)連續進(jìn)一個(gè)樣品就會(huì )出現峰面積忽高忽低，多做幾次purge injector就OK了。

2、用標準品試一下看是不是樣品的問(wèn)題;然后再看看柱壓柱溫、流速、進(jìn)樣器、氘燈有沒(méi)有問(wèn)題。

3、查看定量環(huán)是否有氣泡

4、進(jìn)樣的六通閥、色譜柱接口、泵至色譜柱接口的管路中是否有泄漏現象

其實(shí)，說(shuō)到底一般是兩種情況，要么是樣品的原因，要么是儀器原因。如果是樣品，建議換一下其他物質(zhì)試一下;如果是儀器原因，可能是進(jìn)樣器、定量環(huán)、比例閥等等問(wèn)題。

  附常見(jiàn)故障排除方法，不收藏就太虧了：

1、操作過(guò)程若發(fā)現壓力很小，則可能管件連接有漏，注意檢查。當出現錯誤警告(各組件指示燈均為紅色)，一般為漏液，其中一個(gè)感應器中已有溶劑，漏液故障排除后，擦干，點(diǎn)擊On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再點(diǎn)擊操作界面中的Instrument/System On即可。

2、連接柱子與管線(xiàn)時(shí)，應注意擰緊螺絲的力度，過(guò)度用力可導致連接螺絲斷裂。柱接頭處易發(fā)生漏液，可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊。不同廠(chǎng)家的管線(xiàn)及色譜柱頭結構有差異，不要混用，必要時(shí)可使用PEEK管及活動(dòng)接頭;

3、操作過(guò)程若發(fā)現壓力非常高，則可能管路已堵，應先卸下色譜柱，然后用分段排除法檢查，確定何處堵塞后解決。若是保護柱或色譜柱堵塞，可用小流量流動(dòng)相或以小流量異丙醇沖洗，還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡)，若還是無(wú)法通暢，則需換柱;

4、運行過(guò)程中自動(dòng)停泵，可能為壓力超過(guò)上限或流動(dòng)相用完;

5、樣品瓶中樣品較少，自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣針無(wú)法到達液面，可采用調低進(jìn)樣針進(jìn)樣高度的辦法，注意設置時(shí)不要使進(jìn)樣針碰到瓶底，微量樣品分析應使用微量樣品瓶;

6、自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣針未與樣品瓶瓶口對準時(shí)，需重新定位。

7、泵壓不穩或流量不準，可能為柱塞桿密封圈問(wèn)題或seal wash墊圈問(wèn)題，需更換;

8、基線(xiàn)產(chǎn)生不規則噪聲，可能原因為系統不穩定或沒(méi)達到化學(xué)平衡(使其平衡，若用離子對試劑，在使用使需要足夠的時(shí)間和溶劑體積，色譜柱才能達到足夠的平衡)，流動(dòng)相被污染(更換流動(dòng)相，清洗儲液器、過(guò)濾器，沖洗并重新平衡系統)，色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統的色譜柱或使用一根同類(lèi)的被證明性能好的色譜柱)，檢測器不穩定;

9、短期有規則的噪聲，可能原因為泵壓不穩或泵脈沖，調節溶劑不適當(如兩種溶劑的互溶性問(wèn)題)，泵入口管路松或堵塞，泵太臟，泵柱塞磨損，檢測器不穩定;

10、長(cháng)期有規則噪聲，可能原因為室溫不穩(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當;

11、基線(xiàn)漂移，可能原因為系統不穩或沒(méi)有達到化學(xué)平衡，室溫不穩(未使用柱溫箱)，流動(dòng)相污染或分解，柱污染，檢測池泄漏，系統泄漏，固定相流失(另選流動(dòng)相，另選色譜柱)，測定的波長(cháng)選擇錯誤(對溶劑有吸收)，樣品組分保留太長(cháng)(用強度合適的溶劑清洗色譜柱)，檢測器不穩定;

12、每次進(jìn)樣時(shí)的保留時(shí)間不重復，可能原因為系統不穩或未達到化學(xué)平衡，由于氣泡、各部件磨損等原因引起的泵壓或泵脈沖輸液不穩定，進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高平衡被破壞，溶劑配比不合適，柱被污染;

13、無(wú)峰，可能原因為檢測器選擇錯誤，使用錯誤的流動(dòng)相，樣品降解;

14、色譜峰比預計的小，可能原因為進(jìn)樣體積錯誤，檢測器燈故障，進(jìn)樣問(wèn)題(瓶號錯、進(jìn)樣體積不合適、進(jìn)樣錯誤、針頭堵塞);

15、峰變寬，可能原因為進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高，過(guò)濾器、保護柱入口、柱入口或連接管路有部分堵塞，檢測器時(shí)間常數設置錯誤，進(jìn)樣器問(wèn)題(如閥漏、針頭堵塞或損壞)，柱或保護柱被污染，對流動(dòng)相來(lái)說(shuō)樣品溶劑太強，使用錯誤的色譜柱，溫度變化;

16、出現雙峰/肩峰，可能原因為保護柱或柱入口部分阻塞，柱或保護柱被污染，柱性能下降，保護柱失效，進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過(guò)載)，平衡破壞;

17、前沿峰，可能原因為進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過(guò)載)，平衡破壞，對于流動(dòng)相來(lái)說(shuō)樣品溶劑非極性太強(對于反相柱)，柱或保護柱被污染，柱性能下降，保護柱失效;

18、脫尾峰，可能原因為柱或保護柱被污染，柱性能下降，保護柱失效，進(jìn)樣器問(wèn)題(如閥漏等)，檢測器時(shí)間常數設置錯誤;

19、出現鬼峰，可能原因為流動(dòng)相被污染，樣品預處理時(shí)產(chǎn)生降解或混入雜質(zhì)，先前進(jìn)樣的流出物，樣品定量管清洗不當，注射器臟，柱被污染，進(jìn)樣裝置被污染，流動(dòng)相中含有穩定劑/穩定劑變化。水膜和油膜的外殼有標示的。